Please use this identifier to cite or link to this item:
https://ptsldigital.ukm.my/jspui/handle/123456789/463368Full metadata record
| DC Field | Value | Language |
|---|---|---|
| dc.contributor.advisor | Liew Siew Ling, Dr. | - |
| dc.contributor.author | Ong Khai Lun (P57679) | - |
| dc.date.accessioned | 2023-09-25T09:23:21Z | - |
| dc.date.available | 2023-09-25T09:23:21Z | - |
| dc.date.issued | 2015-04-20 | - |
| dc.identifier.other | ukmvital:77043 | - |
| dc.identifier.uri | https://ptsldigital.ukm.my/jspui/handle/123456789/463368 | - |
| dc.description | Harga vanilin semula jadi yang tinggi dan peningkatan permintaan pelanggan terhadap perisa semula jadi, telah meningkatkan minat pengusaha industri untuk menghasilkan vanilin melalui sumber semula jadi seperti biotransformasi mikroorganisma. Kulat reput putih Pycnoporus cinnabarinus MUCL 39533 telah dibuktikan berupaya menurunkan asid vanilik kepada vanilin. Penurunan asid vanilik kepada vanilin yang melibatkan enzim aril-aldehid dehidrogenase telah dilaporkan di dalam Neurospora crassa. Penghasilan vanilin oleh P. cinnabarinus yang rendah dan pada kadar yang lambat telah mencetuskan kajian ini yang melibatkan penghasilan enzim aril-aldehide dehidrogenase rekombinan. Hipotesis kajian ini adalah aril aldehid dehidrogenase P. cinnabarinus merupakan enzim utama yang menurunkan asid vanilik kepada vanilin. Dalam kajian ini, keupayaan P. cinnabarinus dalam memangkinkan asid vanilik kepada vanilin telah disahkan. Aktiviti enzim dehidrogenase/reduktase bagi ekstrak protein kasar intrasel P. cinnabarinus telah ditentukan. Vanilin yang dihasilkan adalah 46.368±0.977 mgL-1. Ekstrak protein kasar intrasel P. cinnabarinus menunjukkan aktiviti spesifik dehidrogenase/reduktase sebanyak 0.0240 Umg-1 dan memaparkan aktiviti optimum pada 30°C dan pH 7.0. Gen aril-aldehid dehidrogenase (PcALDH) telah dipencilkan daripada P. cinnabarinus berdasarkan penghasilan fragmen gen separa aril-aldehid dehidrogenase melalui tindak balas berantai polimerase (PCR). Pencetus degenerat telah direka bentuk berasaskan kodon-kodon yang berkolerasi dengan kawasan asid amino terpulihara aril-aldehid dehidrogenase bagi beberapa jenis kulat dan bakteria. Jujukan lengkap cDNA PcALDH diperoleh melalui tindak balas berantai polimerase-transkripsi berbalik (RT-PCR) dan amplifikasi pantas hujung cDNA (RACE) PCR. cDNA PcALDH terdiri daripada rangka bacaan terbuka bersaiz 1506 bp yang mengekod protein sebanyak 501 asid amino. Protein PcALDH jangkaan telah menunjukkan identiti jujukan asid amino yang paling tinggi dengan Trametes versicolor ALDH iaitu 84%. Melalui analisis in silico PcALDH, didapati PcALDH merupakan ahli superfamili enzim ALDH dan ALDH Kelas 3. Seterusnya, cDNA PcALDH diklon ke dalam vektor pengekspresan pPICZαA dan digunakan untuk transformasi yis metilotrofik, Pichia pastoris strain X-33. Enzim rekombinan PcALDH telah diekspreskan sebagai protein rekombinan ekstrasel bersaiz ~58 kDa dan ditulenkan dengan menggunakan kromatografi afiniti ion logam terpegun. Enzim lakuran tersasar berpenanda His telah disahkan dengan pemblotan Western; tetapi aktiviti enzim ini tidak dapat dikesan apabila asid vanilik dan vanilin digunakan sebagai substrat, walaupun telah dikaji pada pelbagai parameter termasuk suhu, pH dan koenzim. Ekstrak protein kasar intrasel P. cinnabarinus digunakan sebagai kawalan positif. Maka, dipostulasi bahawa enzim rekombinan yang diekspres telah mengalami proteolisis, agregrasi ataupun hadir dalam kuantiti yang terlalu rendah untuk memberi aktiviti yang dapat dikesan.,Master/Sarjana | - |
| dc.language.iso | may | - |
| dc.publisher | UKM, Bangi | - |
| dc.relation | Faculty of Science and Technology / Fakulti Sains dan Teknologi | - |
| dc.rights | UKM | - |
| dc.subject | Kulat reput putih | - |
| dc.title | Pemencilan, pengklonan dan pengekspresan gen aril-aldehid dehidrogenase daripada kulat reput putih pycnoporus cinnabarinus strain MUCL 39533 | - |
| dc.type | theses | - |
| dc.format.pages | 150 | - |
| dc.identifier.barcode | 001432 | - |
| Appears in Collections: | Faculty of Science and Technology / Fakulti Sains dan Teknologi | |
Files in This Item:
| File | Description | Size | Format | |
|---|---|---|---|---|
| ukmvital_77043+SOURCE1+SOURCE1.0.PDF Restricted Access | 2.95 MB | Adobe PDF |  View/Open |
Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.