Pembangunan enzim rekombinan selobiohidrolase (AV12) dan endoglukanase (EG1) untuk pencuraian tandan kosong kelapa sawit

Amatul Samahah Md Ali (P48537 )

Please use this identifier to cite or link to this item: https://ptsldigital.ukm.my/jspui/handle/123456789/463292

Full metadata record

DC Field	Value	Language
dc.contributor.advisor	Abdul Munir Abdul Murad, Prof. Madya Dr.	-
dc.contributor.author	Amatul Samahah Md Ali (P48537 )	-
dc.date.accessioned	2023-09-25T09:21:02Z	-
dc.date.available	2023-09-25T09:21:02Z	-
dc.date.issued	2014	-
dc.identifier.other	ukmvital:75399	-
dc.identifier.uri	https://ptsldigital.ukm.my/jspui/handle/123456789/463292	-
dc.description	Dalam kajian ini, dua selulase rekombinan, selobiohidrolase, Avi2 daripada Humicola insolens dan endoglukanase, Eg1, daripada Thermoascus aurantiacus telah dibangunkan bagi menghidrolisis tandan kosong kelapa sawit (TKKS) kepada gula ringkas. Jujukan cDNA avi2 and eg1 telah diamplifikasi dengan menggunakan PCR transkripsi berbalik dan diklon ke dalam vektor pengklonan, p-GEMT Easy, dan seterusnya ke dalam vektor pengekspresan Pichia pastoris, pPICZαC. Vektor pengekspresan eg1_pPICZαC dan avi2_pPICZαC, masing-masing membawa cDNA eg1 dan avi2, dicerna dan ditransformasi ke dalam hos pengekspresan, P. pastoris X-33. Avi2 and Eg1 telah berjaya diekspres sebagai protein rekombinan ekstrasel, masing-masing bersaiz 53.2 kDa and 36.6 kDa. Penghasilan kedua-dua enzim disahkan melalui analisis pemblotan Western dan pengasaian aktiviti. Kedua-dua enzim rekombinan yang terlakur dengan penanda poli-histidina telah ditulen dengan menggunakan kromatografi afiniti ion logam terpegun. Seterusnya, pencirian biokimia bagi Avi2 and Eg1 tertulen seperti pengenalpastian suhu dan pH optimum, kestabilan suhu dan pH, kesan ion logam serta kespesifikan substrat telah dijalankan. Avi2 rekombinan mempunyai aktiviti optimum pada suhu 60°C manakala Eg1 rekombinan mempunyai aktiviti optimum pada suhu 70°C. Kedua-dua enzim juga menunjukkan pH optimum yang berbeza iaitu pada pH 5.0 bagi Avi2 dan pH 4.0 bagi Eg1. Kedua-dua enzim ini stabil pada pH 3.0 hingga pH 9.0, dimana enzim-enzim ini dapat mengekalkan lebih daripada 80% aktiviti asalnya setelah dieram pada pH yang berbeza selama 30 minit. Avi2 dan Eg1 stabil pada suhu di antara 30°C hingga 60°C. Avi2 menunjukkan aktiviti tertinggi terhadap avicel di mana aktiviti spesifik ialah 75 mUmg-1 manakala Eg1 pula menunjukkan aktiviti tertinggi terhadap substrat carboxymethyl cellulose (CMC) iaitu sebanyak 610 Umg-1. Aktiviti Avi2 rekombinan telah ditingkatkan dengan kehadiran beberapa ion logam seperti Mn2+, Co2+, Ba2+ dan K+ manakala aktiviti Eg1 rekombinan ditingkatkan dengan kehadiran Zn2+, Ca2+, Co2+, Cu2+, Mn2+, dan Fe2+. Seterusnya beberapa formulasi campuran Avi2 dan Eg1 rekombinan telah digunakan untuk menghidrolisis 1% (j/i) selulosa TKKS. Hasil hidrolisis TKKS pada suhu 50°C dan pH 6.0 menunjukkan bahawa campuran Avi2 dan Eg1, pada nisbah campuran 2:3 dan dengan penambahan enzim β-glukosidase serta ion logam, dapat menghasilkan gula penurun tertinggi. Kajian ini mencadangkan campuran Avi2 dan Eg1 rekombinan berpotensi untuk diguna bagi mencurai TKKS kepada gula ringkas.,Master/Sarjana	-
dc.language.iso	may	-
dc.publisher	UKM, Bangi	-
dc.relation	Faculty of Science and Technology / Fakulti Sains dan Teknologi	-
dc.rights	UKM	-
dc.subject	Selobiohidrolase (AV12)	-
dc.subject	Endoglukanase (EG1)	-
dc.subject	Hydrolases \\x Industrial applications	-
dc.title	Pembangunan enzim rekombinan selobiohidrolase (AV12) dan endoglukanase (EG1) untuk pencuraian tandan kosong kelapa sawit	-
dc.type	theses	-
dc.format.pages	139	-
dc.identifier.callno	TP248.65.H93A463 2014 tesis	-
Appears in Collections:	Faculty of Science and Technology / Fakulti Sains dan Teknologi

Files in This Item:

File	Description	Size	Format
ukmvital_75399+Source01+Source010.PDF Restricted Access		3.96 MB	Adobe PDF	View/Open

Show simple item record Recommend this item